Con người Trà Ôn có truyền thống đoàn kết, yêu quê hương đất nước, cần cù lao động, giàu lòng nhân ái, hiếu khách và trọng nhân nghĩa. Đặc trưng này trở thành nét đẹp văn hoá được lưu giữ và truyền lại từ thế hệ này sang thế hệ khác. Ba dân tộc Kinh, Khmer, Hoa sống đan xen, đoàn kết chan hoà, tương thân tương ái, có truyền thống chống áp bức bất công, chung sức chung lòng gìn giữ và xây dựng phát triển quê hương.
Dân tộc Kinh lập cư ở các vùng đất phù sa ven sông, ven kênh rạch, hoặc tuyến đường giao thông, hoạt động kinh tế chủ yếu là sản xuất nông nghiệp, một số ít làm nghề tiểu thủ công nghiệp và thương mại dịch vụ.
Dân tộc Khmer sinh sống chủ yếu ở vùng đất cao, đất giồng vùng nông thôn, tập trung nhiều nhất ở 2 xã Tân Mỹ, Trà Côn, một số ít ở 2 ấp Trà Sơn, Vĩnh Hoà xã Hựu Thành và ấp Mỹ Trung xã Thiện Mỹ; người Khmer rất chất phác thật thà, siêng năng lao động, thường sống tập trung thành phum sóc dưới sự lãnh đạo tinh thần của các vị sư cả, chịu ảnh hưởng rất lớn văn hoá Phật giáo Nam tông, chủ yếu là sản xuất nông nghiệp.
Dân tộc Hoa sống rải rác xen với cộng đồng người Kinh, tập trung nhiều ở Thị trấn, các trung tâm xã, chủ yếu làm nghề dịch vụ buôn bán, tiểu thủ công nghiệp, y dược.
Người Kinh hàng năm có 03 Tết chính là Tết Nguyên Đán, Tết Đoan Ngọ, Tết Trung Thu được tổ chức theo phong tục; người Khmer ba lễ lớn là Chol chnam thmây, Sen Đônta và Ốc Ombốc; người Hoa còn tổ chức Thanh Minh. Thời gian gần đây ở các bãi cồn mới nổi xã Lục Sĩ Thành xuất hiện một nét văn hoá mới là nhân Tết Đoan Ngọ (mùng 5 tháng 5 âl) rất nhiều bà con trong vùng, du khách gần xa đến tắm cồn cát và tham quan chợ nổi Trà Ôn, các vườn cây ăn trái đặc sản ở xã Lục Sĩ Thành, Phú Thành.
Sinh hoạt văn hoá truyền thống của nhân dân Trà Ôn mang đậm bản sắc văn hoá sông nước vùng Đồng bằng sông Cửu Long. Tất cả các xã - thị trấn đều có câu lạc bộ đờn ca tài tử vì đây là bộ môn nghệ thuật được ưa thích. Nơi đây cũng sinh ra rất nhiều nghệ sĩ tài danh như nhạc sĩ Tạ Thanh Sơn, nghệ sĩ nhân dân Út Trà Ôn,.…
Đại bộ phận cư dân Trà Ôn có tập tục thờ cúng tổ tiên để thể hiện lòng biết ơn các bậc sinh thành, hầu như nhà nào cũng cúng giỗ ông bà, cha mẹ, bà con thân thuộc. Tại các đình làng đều có tập tục thờ Thành hoàng bổn cảnh, thờ Thần Nông và các vị khai quốc công thần,… với các sinh hoạt lễ hội truyền thống, trò chơi dân gian để tỏ lòng biết ơn đối với các bậc tiền nhân đã có công khai phá tạo dựng hoặc cầu quốc thái dân an, cầu cho nông nghiệp trúng mùa. Các đình làng mỗi năm đều có 3 ngày Lễ lớn là Lễ Kỳ Yên, Lễ Hạ Điền và Lễ Thượng Điền. Các tín ngưỡng dân gian này thể hiện đạo lý uống nước nhớ nguồn, ăn trái nhớ kẻ trồng cây của nhân dân Việt Nam.
Phật Giáo truyền bá đến huyện rất sớm theo con đường những người di dân đến khai phá vùng đất này từ thế kỷ 17 - 18, Chùa Phước Hậu được xây dựng quy mô từ năm 1710 ( còn gọi là chùa Cả Gồng, tọa lạc tại ấp Đông Hậu, xã Ngãi Tứ trước đây thuộc Quận Trà Ôn - nay thuộc huyện Tam Bình); chùa cổ Long An được xây dựng năm 1860 (Chùa còn có tên Đồng Đế, hiện tọa lạc tại ấp Mỹ Trung, xã Thiện Mỹ). Các chùa Phật Giáo phân bổ khắp các xã trong huyện, tín đồ Phật giáo đông nhất với gần 1/3 dân số toàn huyện, hầu hết người Kinh theo Phật Giáo Bắc tông - còn người Khmer theo Phật Giáo Nam tông.
Công Giáo được các linh mục người Pháp truyền bá đến huyện từ thế kỷ 18, Nhà thờ Trà Ôn được xây dựng kiên cố năm 1858 và Nhà thờ Xuân Hiệp xây dựng năm 1888. Các họ đạo Công Giáo tập trung ở các khu vực trung tâm hoặc ven các trục giao thông trọng yếu như Thị trấn Trà Ôn, Tân Mỹ, Vĩnh Xuân, Tân Dinh, Xuân Hiệp, Hựu Thành, giáo dân chiếm khoảng 3% dân số toàn huyện.
Đạo Cao Đài truyền bá tới huyện khoảng năm 1926 - 1927 từ đạo gốc Tây Ninh, thuộc phái Tiên Thiên. Về sau đạo này phân hoá thành Cao Đài Tây Ninh - Cao Đài Bến Tre và có tín đồ chiếm gần 2% dân số toàn huyện.
Ngoài ra, có khoảng 600 – 700 người theo đạo Hoà Hảo, Tin Lành và một số ít người theo các tôn giáo khác.
Hiện nay có hơn 80 cơ sở thờ tự và tín ngưỡng dân gian gồm: Chùa Phật 29 (có 06 chùa phật giáo nam tông khmer), Nhà thờ Công giáo 07, Tin Lành 01, Cao Đài Bến Tre 07, Cao Đài Tây Ninh 03, Lăng Ông 01 và 18 Đình Làng, 15 am miếu,…trong đó có 01 cơ sở được công nhận công trình văn hóa cấp quốc gia là Lăng Ông Thống Chế Điều Bát Nguyễn Văn Tồn (xã Thiện Mỹ) và 05 cơ sở văn hóa cấp tỉnh là Chùa Gia Kiết - Chùa Gò Xoài (xã Tân Mỹ), Đình Hậu Thạnh (xã Lục Sĩ Thành), Đình làng Thiện Mỹ (Thị trấn Trà Ôn), Đình Vĩnh Thuận (xã Thuận Thới) thường xuyên sinh hoạt tôn giáo, lễ hội đúng nghi thức.